1994'te Senna gerileyen McLaren takımını bırakıp, dönemin en iyi takımı olan Williams takımına geçmişti. Bu takımla üçüncü katılımında, Imola pistinde 7. turda 210 km. hızla Tamburello Dönemecine girdi. Virajı dönemeyip beton duvara çarpan Senna, direksiyon milinden kopan bir kaynak parçasının kaskı delerek başına saplanması sonucu 34 yaşında hayatını kaybetti. Bu katılımtan önce Senna, direksiyonun kendisine çok yakın olduğunu ve bunun da sürüşünü etkilediğini söylemişti. Direksiyon milini kestiler, kısalttılar ve tekrar kaynak yaptılar. Ancak Senna bu işlemin sonu olacağını bilmiyordu. Saat 18:40'ta Senna'nın ölüm haberi geldi. Pistin kapanmasını önlemek için, Senna'nın hastanede öldüğü açıklandı. Ancak Senna hayatını pistte kaybetmişti. Ölümünden birkaç ay önce yaptığı bir röportajda şunları söylemişti: katılımlar, rakiplerle mücadele benim kanımdadır benim bir parçamdır. Eğer bir gün, hayatıma mal olacak bir kaza geçirirsem tek isteğim herşeyin hemen, bir anda olup bitmesidir. Tekerlekli sandelyeye mahkum kalmak istemem ya da hastane köşelerinde yıllarca sürünmek de istemem. Yaşayacaksam herşeyimle, bir bütün olarak yaşamalıyım. Yarım olarak yaşamak beni mahveder... Bugün de ismi saygıyla anılmaktadır.